QPCR-Sondenmethode

Mar 01, 2022 Eine Nachricht hinterlassen

Coronavirus ist eine Art Virus mit einer Hülle und einem linearen einzelsträngigen positivsträngigen RNA-Genom. Sein Durchmesser beträgt etwa 80-120 nm. Derzeit infiziert es nur Wirbeltiere wie Mensch, Maus, Schwein, Katze, Hund und Geflügel. Das neue Coronavirus COVID-19 wurde als neue Variante identifiziert, die virale Lungenentzündung, leichtes Fieber, trockenen Husten, schwere Atembeschwerden und sogar einen Schock verursachen kann.

Das von RXC entwickelte Nukleinsäure-Nachweiskit (QPCR-Sondenmethode) für das neue Coronavirus (COVID-19) entwickelte ein Doppelzieldesign, das auf dem ORF 1ab (RDRP-Gen) des neuen Coronavirus und der spezifischen konservierten Sequenz basiert, die das N-Gen von codiert Nucleocapsid-Protein. Unter Verwendung der einstufigen Reverse-Transkriptions-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) in Kombination mit der TaqMan-Hydrolyse-Sondentechnologie wurde die Proben-RNA durch die Änderung des Fluoreszenzsignals auf dem quantitativen Fluoreszenz-PCR-Instrument nachgewiesen.

Das PCR-Nachweissystem umfasst Primer und Sonden für interne Standardgene. Der Prozess der Probenentnahme und -extraktion wird überwacht, indem festgestellt wird, ob der interne Standard normal ist, um falsch negative Ergebnisse zu vermeiden.

Das von Rui Xun Biology entwickelte Nukleinsäure-Nachweiskit für das neue Coronavirus (COVID-19) (digitale PCR-Methode) verwendet die Tröpfchen-Digital-PCR-Technologie in Kombination mit der Taqman-Fluoreszenzsondentechnologie, um einen qualitativen Nachweis des neuen Coronavirus durchzuführen.

Die Proben wurden nach dem Zufallsprinzip Zehntausenden von Öltröpfchen zugeordnet, die mit einem digitalen PCR-Chip hergestellt wurden. Das Tröpfchen wurde mit PCR umgesetzt. Nach Abschluss der PCR-Reaktion wurden die Fluoreszenzsignale jedes Tröpfchens ausgelesen, und das Poisson-Verteilungsprinzip wurde für Statistiken und Analysen verwendet, um einen genauen Nachweis von für das neue Coronavirus (COVID-19) spezifischen Genkopien zu erreichen.

Unter ihnen wurde die Covid-19-ORF-1ab-Nachweissonde mit FAM-Fluoreszenz, die N-Gen-Nachweissonde mit Hex-Fluoreszenz und der interne Standard mit Cy5-Fluoreszenz markiert.


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