Der Chemilumineszenz-Immunoassay (CLIA) ist eine hochempfindliche Immunoassay-Technik.
1. Grundsatz
Der Chemilumineszenz-Immunoassay kombiniert die Spezifität der Immunantwort mit der hohen Empfindlichkeit der Chemilumineszenz. Sein Grundprinzip besteht darin, die spezifische Immunantwort zwischen Antigen und Antikörper mit einer Chemilumineszenzreaktion zu kombinieren. Insbesondere verbindet sich das Antigen in der zu testenden Probe mit einem spezifischen Antikörper, um einen Immunkomplex zu bilden. Anschließend erzeugt der Immunkomplex durch eine Reihe chemischer Reaktionen ein Chemilumineszenzsignal. Die Lumineszenzintensität ist proportional zur Konzentration des zu testenden Antigens, und der Gehalt des zu testenden Antigens kann durch Erfassen der Lumineszenzintensität quantitativ analysiert werden.
2. Hauptkomponenten
Antikörper: Dazu gehören Fängerantikörper und Detektionsantikörper. Der Fängerantikörper ist üblicherweise auf einem Festphasenträger fixiert, um das zu testende Antigen einzufangen. Der Detektionsantikörper ist mit einem chemilumineszierenden Marker kombiniert, um das Antigen im Immunkomplex zu erkennen.
Festphasenträger: wie Mikroplatten, magnetische Perlen usw., die zum Fixieren des Capture-Antikörpers verwendet werden, um die Immunreaktion sowie die Trennung und Wäsche zu erleichtern.
Chemilumineszenzmarker: in der Regel eine Substanz, die bei einer chemischen Reaktion ein Lumineszenzsignal erzeugen kann, wie etwa Luminol, Acridiniumester usw. Der Marker verbindet sich mit dem Nachweisantikörper und erzeugt nach der Immunreaktion ein Chemilumineszenzsignal.
Detektionssystem: Dazu gehören Geräte wie Lumineszenzdetektoren, die dazu dienen, die Intensität von Chemilumineszenzsignalen zu erkennen und diese in lesbare Werte umzuwandeln.
3. Funktionen
Hohe Empfindlichkeit: Es können extrem niedrige Konzentrationen der Testsubstanz erkannt werden und ist in der Regel um mehrere Größenordnungen empfindlicher als herkömmliche Immunassay-Methoden.
Breiter linearer Bereich: Der Gehalt der Testsubstanz kann in einem breiten Konzentrationsbereich ohne Mehrfachverdünnung genau gemessen werden.
Starke Spezifität: Aufgrund der spezifischen Bindung von Antigen und Antikörper ist eine hohe Selektivität für bestimmte Testsubstanzen gegeben.
Schnell: Der Erkennungsprozess ist relativ schnell und die Ergebnisse können im Allgemeinen in kürzerer Zeit erzielt werden.
Hoher Automatisierungsgrad: Es eignet sich für die Erkennung großer Proben und kann in Verbindung mit automatisierten Instrumenten verwendet werden, um die Erkennungseffizienz zu verbessern.
4. Anwendungsgebiete
Klinische Diagnose: Wird zum Erkennen verschiedener Biomarker wie Tumormarkern, Hormonen, Markern für Infektionskrankheiten usw. verwendet und bietet eine wichtige Grundlage für die Krankheitsdiagnose, die Behandlungsüberwachung und die Prognosebewertung.
Arzneimittelentwicklung: Es wird zur Überwachung der Arzneimittelkonzentration, zur Bewertung der Wirksamkeit und zur Erforschung des Arzneimittelstoffwechsels verwendet.
Lebensmittelsicherheitsprüfungen: Nachweis von Schadstoffen, Pestizidrückständen, Tierarzneimittelrückständen etc. in Lebensmitteln.
Umweltmonitoring: Erkennung von Schadstoffen und Giftstoffen in der Umwelt.